Sigma胎牛血清
    

SERANA胎牛血清·Gibco胎牛血清·Sigma胎牛血清·Hyclone胎牛血清·Gemini胎牛血清·BOVOGEN胎牛血清·BI胎牛血清

  • 牛血清质量检定指标

1、化学检定:包括渗透压(240~340)、pH(7.0~8.0)、总蛋白含量(3.5~5.0%)、血红蛋白 (≤0.02%)

2、 微生物检查:细菌和真菌——直接培养法、噬菌体——噬斑法和增殖法 支原体——培养法和DNA染色法 、牛病毒——细胞培养法。要求均为阴性

3、内毒素检测——凝胶法和动态浊度法 要求内毒素含量≤10EU/ml

4、促细胞生长测定(SP2/0-Ag14标准规定)

1)最大增殖浓度≥1.0×106个/ml、倍增时间≤20小时

克隆率=(阳性孔平均数/培养孔总数)×100%

2)贴壁效率( VERO细胞、二倍体细胞等)

10%血清――50或100个细胞/孔

贴壁效率(%)=(每孔克隆平均数/每孔存活的培养细胞平均数)×100

相对贴壁效率=被测血清贴壁效率/参考血清贴壁效

以上项目检定结果应符合2005版《中国药典》第三部的相关规定。血清厂家应在此基础上结合疫苗病毒生产工艺建立企业内控检定项目并建立相应的检定方法,保证疫苗病毒生产的稳定性,提高疫苗制品的质量。

二、牛血清的分类

根据牛出生时间和血清采制分离方法分为:

1、胎牛血清:八月龄胎牛心脏穿刺取血;

2、新生牛血清:出生12~24小时新生牛静脉采血;

高级新生牛血清:采血后静置自然析出的血清;

标准新生牛血清:经离心分离的血清;

普通新生牛血清:融血或微融血的血清;

3、小牛血清:出生三月龄小牛动脉采血分离血清;

三、牛血清在细胞培养基中的主要功能

牛血清是细胞培养中用量最大的天然培养基,含有丰富的细胞生长必须的营养成份,具有极为重要的功能。

1、提供能促使细胞指数生长的激素、基础培养基中没有或含量微小的营养物,以及某些低分子营养物质;

2、提供结合蛋白,识别维生素、脂类、金属离子,并与有毒金属和热源物质结合,起解毒作用;

3、是细胞贴壁、铺展生长所需因子的来源;

4、起酸碱度缓冲液作用;

5、提供蛋白酶抑制剂,细胞传代时使剩余胰蛋白酶失活,保护细胞不受损伤。

四、牛血清的质量要求

一)WHO公布的《用动物细胞体外培养生产生物制品规程》中的要求

1. 牛血清必须来自有文件证明无牛海绵状脑病的牛群或国家,并应具备适当的监测系统。

2.有些国家还要求牛血清来自没有用过反刍动物蛋白饲料喂养的牛群。

3.要能证明所用牛血清中不含对所生产疫苗病毒的抑制物。

4.血清要通过滤膜过滤除菌,保证无菌。

5.无细菌、霉菌、支原体和病毒的污染,有些国家要求无大肠杆菌噬菌体污染。

6.要求血清对细胞有良好的支持繁殖作用。

(二)我国在对牛血清的质量标准最早在2000年版《中国生物制品主要原辅材料质控标准》中提出。包括物理性状、总蛋白,血红蛋白、细菌、真菌、支原体、牛病毒、大肠杆菌噬菌体、细菌内毒素,支持细胞增殖检查。2005版药典颁布之后,小牛血清质量标准被纳入《中国药典》2005年版 第三部 生物制品分册。

(三)美国对牛血清的质量要求:

Gibco 和Hyclone等美国主要血清供应商的牛血清都已进入到我国市场,他们对血清质量标准有严格要求,从血清来源到产品质量都有明确规定。

1、血清来源 :可从世界各地收集胎牛血清,但必须符合其质量标准和美国农业部进口要求。

2、血清的收集:必须符合工业生产的标准,低温采集,一次分离,分离后立即混合冻存。

3、血清的制备:超低IgG胎牛血清、透析血清、γ-射线辐照;

4、除菌过滤:0.22μm和0.1μm滤膜过滤;

5、成品分装:根据需要分装成不同规格。

五、牛血清的使用所产生的常见问题

(一)由于血清营养丰富,贮存条件特殊,因此在贮存和使用过程中容易产生以下问题:

1、改变培养液的pH值

牛血清的pH理论值为7.0~8.0,培养基在加入规定量的碳酸氢钠后(即达到细胞生长所需要的渗透压),再加入10%的牛血清,一般会使培养液的pH值发生改变。因此在使用过程中应注意pH的变化,如有必要可用1mol/L NaOH或1mol/L HCl调pH到所需值。

2、由于血清的营养成分丰富,非常适合细菌、真菌和支原体等生长。国产血清大部分采用手工分装,因此容易把微生物带入而使得血清被污染。使用前如果没有及时发现,将会把污染物带入正在培养的细胞中,而使得细胞不能正常生长。

3、血清在贮存解冻过程中会产生沉淀,这是由于血清中含有大量脂蛋白、纤维蛋白及多肽类物质,在-15℃冷冻保存解冻后就会自然形成沉淀,随着保存时间的延长,沉淀量会增加。因此在融化血清时一般应先在4℃放置使之解冻,然后放在室温使血清完全融化,以避免沉淀的增加。添加血清时应避免把沉淀加入培养液,否则由于沉淀的存在会使得所培养的细胞产生大量黑点,或者细胞表面将会覆盖一层油状物质,影响细胞的正常生长。为减少血清的损失,可以把有沉淀的血清收集起来进行离心处理,将上清液加入培养液使用(一般不建议采用过滤的方法除去沉淀,因为沉淀会堵塞滤膜而无法过滤)。

(二)大规模细胞培养中牛血清对细胞及病毒滴度的影响

血清是一种成分复杂的混合物,不同批次血清对细胞生长的促进作用不同。大规模细胞培养中由血清引起的细胞生长状态不佳及病毒滴度的影响表现在以下几个方面:

1、细胞生长速度缓慢,长满单层时间长;从同一细胞瓶中分出两瓶细胞,用同一种培养液,分别加入10%的对照血清和待检血清,在相同条件下培养72小时,会出现对照血清长满单层,而待检血清大约只有60~70%,这种血清就不适合用来大规模培养细胞。

2、细胞传代后形态不正常,细胞状态发生变化 ;由于血清的质量问题,使原本状态正常的细胞经传代后形态会变差;比如:细胞瓶里会出现一些蠕动的小黑点(并非污染),或者细胞表面形成一层油状覆盖物;细胞的轮廓变得模糊,细胞之间的间隙被血清中的蛋白颗粒填充,从而影响细胞向四周扩展生长。

3、细胞传几代后就出现脱壁现象,不能连续传代 ;质量较差的血清缺乏某种细胞的贴壁因子,会使细胞在传代过程中逐渐丧失贴壁的能力。细胞会从正常的贴壁状态,边缘开始萎缩,上翘。观察到的现象就是细胞表面不光滑,晃动细胞瓶会看到细胞表面有絮状物随培养液波动。随着传代次数增加,细胞萎缩的情况越来越严重,直到最终完全脱壁而死亡。

4、细胞长的很好,致密的单层,状态也很正常,但是接毒后细胞基本不发生病变,做滴度检测几乎测不出抗原滴度。这种情况也许是因为血清中含有与接种的病毒有同源的特异性抗体。比如血清中经常会存在乙脑抗体,牛腹泻病毒抗体等,如果存在这些抗体,就会把接进去的病毒给中和掉。如果抗体滴度很高,病毒会被抗体完全中和,就没有病毒颗粒在细胞中增殖,所以会检测不到病毒滴度。这种情况给疫苗企业造成的损失是相当大的,不产毒等于前面所做的那么多工作全部白费,浪费人力、物力,尤其是时间上的浪费,从培养细胞开始到接病毒,到收液至少需要一两个月,一旦出现不产毒的情况,那么这一两月时间就白白浪费掉了,这也是牛血清给疫苗企业造成的风险之一。

5、细胞生长的状态一般,产毒少,毒价低。这种情况比较常见,细胞是病毒的载体,由于血清质量不好,导致细胞生长状态不好,病毒就无法进行正常的复制。并非所有病毒都不能复制,所以就造成疫苗的效价不够,可能造成不合格产品。

看来一款血清直接关系细胞的生死存亡,不用担心,慧颖提供无支原体,低内毒素和低血红素的,无反复冻融的高品质血清

慧颖专业血清10年,提供无支原体、低内毒素、无反复冻融,清澈,清透,高品质进口血清

SERANA胎牛血清·Gibco胎牛血清·Sigma胎牛血清·Hyclone胎牛血清·Gemini胎牛血清·BOVOGEN胎牛血清·BI胎牛血清

常备现货血清列表如下:

 

2015年,素尔生物获得德国SERANA血清中国区代理商,诚招全国给地经销商                                                                          

产品名称         货号         来源         规格         市场价格         备注                           

胎牛血清FBS  S-FBS-SA-011    SOUTH AMERICA     100ML      1100         较贵细胞,原代细胞,肿瘤细胞均可                           

胎牛血清FBS  S-FBS-SA-015    SOUTH AMERICA     500ML      2500         较贵细胞,原代细胞,肿瘤细胞均可                           

胎牛血清FBS  S-FBS-US-015   USA  500ML      4800         胚胎干细胞,神经类细胞,昆虫细胞,哺乳细胞等                           

超低IgG胎牛血清Ultra-low IgG FBS    S-FBS-SA-055    SOUTH AMERICA     500ML      5200                                    

透析胎牛血清Dialyzed FBS   S-FBS-US-065   USA  500ML      5800                                    

活性炭/葡聚糖处理胎牛血清Charcoal Stripped FBS   S-FBS-AU-045   AUSTRALIA       500ML      5800

备注:SERANA血清生产:

  SERANA血清生产原料均符合FDA及EC标准,公司通过了ISO9001认证。绝大多数来源的FBS通过EDQM(欧洲药品质量管理局)认证。

  完整可追溯性:

  从血清原料的收集直至最终无菌过滤的产品,SERANA管理并记录了所有相关的进程。这保证了从动物源直到终产品的完整可追溯性。SERANA为所有的客户提供完整全面的批次记录,包括原产地证明、健康证明、分析证书和其他批签发记录。

  血清产品的检测和测试:

  胎牛采集血清前,怀孕胎牛会按欧洲EU Regulation 999/2001规定进行BSE检测,只有BSE检测阴性的才被采集;胎牛血清经3次100纳米过滤,经BVD、IBR、PI3等病毒检测;细菌、真菌、支原体检测;每一批胎牛血清都经生长测试和克隆率测试,测试细胞包括:HeLa, L929, SP2/O-AG14, MRC-5,CHO and BHK。SERANA胎牛血清的内毒素含量非常低,有些批次甚至低于0.02 EU/ml;

  样品的供应和批号的保留:

SERANA血清会按客户的需求提供2-3个不同批次规格为50ml的免费样品供客户筛选,筛选合格的批次,SERANA会为客户免费储存12-18个月。

 

2014年获得澳洲BOVOGEN中国江苏、浙江、上海区一级代理权                                                                 

产品名称         货号         来源         规格         市场价格         备注                           

胎牛血清FBS  SFBS SOUTH AMERICA     500ML      2600         较贵细胞,原代细胞,肿瘤细胞均可                           

胎牛血清FBS  SFBS AUSTRALIA       500ML      6000         胚胎干细胞,神经类细胞,昆虫细胞,哺乳细胞等                           

新生牛血清New born calf serum          SNCS         New Zealand   500ML      1300         肿瘤细胞、诊断、生产等             

 

相关Hyclone新生牛血清(货号:SH30401.02) 高品质产品还有:

产品名称         货号         来源         规格         市场价格

胎牛血清FBS  10270-106        SOUTH AMERICA     500ML      3200

胎牛血清FBS  10270-106        SOUTH AMERICA     500ML      3200

胎牛血清FBS  c2027050          SOUTH AMERICA     500ML      2600

优等胎牛血清FBS  10437-028        Mexico   500ML      3200

优等胎牛血清FBS  10437-028        Mexico   500ML      3200

优等胎牛血清FBS  10437-028        Mexico   500ML      3200

优等胎牛血清FBS  10099-141        AUSTRALIA       500ML      7000

优等胎牛血清FBS  10099-141        AUSTRALIA       500ML      7000

优等胎牛血清FBS  10099-141        AUSTRALIA       500ML      7000

特级胎牛血清FBS  16000-044        USA  500ML      5800

特级胎牛血清FBS  16000-044        USA  500ML      5800

特级胎牛血清FBS  16000-044        USA  500ML      5800

优等胎牛血清FBS  26140-079        USA  500ML      3600

优等胎牛血清FBS  26140-079        USA  500ML      3600

热灭活胎牛血清FBS heat inactivated   10082-147        USA  500ML      5600

热灭活胎牛血清FBS heat inactivated   10100-147        AUSTRALIA       500ML      14239

热灭活胎牛血清FBS heat inactivated   10100-147        AUSTRALIA       500ML      14239

超低IgG胎牛血清Ultra-low IgG FBS    16250-078        USA  500ML      6000

透析胎牛血清Dialyzed FBS   264000-044      USA  500ML      6800

活性炭/葡聚糖处理胎牛血清Charcoal Stripped FBS   12676-029        USA  500Ml       6800

新生牛血清New born calf serum          16010159         New Zealand   500ML      1035

马血清Horse Serum       16050-122        New Zealand   500ML      909

热灭活马血清Heat-Inactivated Horse Serum       26050-088      New Zealand   500Ml       1069

胎牛血清FBS  Sv30087.01      SOUTH AMERICA     100ML      800

胎牛血清FBS  Sv30087.02      SOUTH AMERICA     500ML      1800

优等胎牛血清FBS  SH30084.03     AUSTRALIA       500ML      5800

优等胎牛血清FBS  SH30084.03     AUSTRALIA       500ML      5800

优等胎牛血清FBS  SH30084.03     AUSTRALIA       500ML      5800

特级胎牛血清FBS  SH30396.03     Canada    500ML      3900

特级胎牛血清FBS  SH30396.03     Canada    500ML      3900

特级胎牛血清FBS  SH30070.03     USA  500ML      3900

特级胎牛血清FBS  SH30070.03     USA  500ML      3900

特级胎牛血清FBS  SH30070.03E   USA  500ML      5600

特级胎牛血清FBS  SH30070.03E   USA  500ML      5600

标准胎牛血清FBS  SH30370.03     AUSTRALIA       500ML      2800

标准胎牛血清FBS  SH30370.03     AUSTRALIA       500ML      2800

活性炭/葡聚糖处理胎牛血清Charcoal Stripped FBS   SH30068.03     USA  500ML      6000

活性炭/葡聚糖处理胎牛血清,热灭活,Charcoal Stripped FBS         SH30068.03HI USA  500ML      6000

新生牛血清New born calf serum          SH30406.01     New Zealand   500ML      1300

马血清Horse Serum       SH30074.03     USA  500ML      980

 

其它品牌 –常卖货号

产品名称         货号         来源         规格         品牌

胎牛血清FBS  A15-101   EU    500ML      PAA

胎牛血清FBS  A15-151   EU    500ML      PAA

胎牛血清FBS  04-001-1ACS  SOUTH AMERICA     500ML      BI

胎牛血清FBS  F2442     USA  500ML      SIGMA                                           

 

 

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    收录时间:2016年10月29日 01:23:27 来源:中国化工机械设备网 作者:匿名
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