【求助】pbs缓冲液应该如何配置,离子强度指的是什么啊
    

磷酸盐缓冲液(pbs)配制方法

0.01m pbs

pbs (135 mm nacl, 2.7 mm kcl, 1.5 mm kh2po4, and 8 mm k2hpo4,ph 7.2)

pbs缓冲液(ph7.2~7.4):nacl 137mmol/l,kcl 2.7mmol/l,na2hpo4 4.3mmol/l, kh2po4 1.4mmol/l

称7.9g nacl,0.2g kcl,0.24g kh2po4(or 1.44g na2hpo4)和1.8g k2hpo4,溶于800 ml 蒸馏水中,用hcl调节溶液的ph值至7.4,最后加蒸馏水定容至1 l。保存于4℃冰箱中即可。

需要注意的是,通常所说的浓度0.01 m指的是缓冲溶液中所有的磷酸根浓度,而非na 离子或k 离子的浓度,na 离子和k 离子只是用来调节渗透压的。

母液的配制:

0.2m na2hpo4:称取 71.6g na2hpo4-12h2o,溶于 1000ml 水

0.2m nah2po4:称取 31.2g nah2po4-2h2o,溶于1000ml 水

各种浓度pb(ph=7.4)的配制:

先配 0.2m pb (ph=7.4,100ml):取19ml 0.2mol/l的 nah2po4, 81ml 0.2mol/l 的 na2hpo4, 即可。

然后 只需将0.2m pb (ph=7.4)按相应比例适当稀释 即可,如:

0.1m pb(ph=7.4) :取 500ml 0.2m pb,加水稀释至 1000ml 即可。

0.01m pb (ph=7.4):取50ml 0.2m pb,加水稀释至 1000ml 即可。

0.02m pb (ph=7.4):取100ml 0.2 m pb,加水稀释至 1000ml 即可。

若需要 nacl的话,加入 nacl 至0.9%(g/100ml)即可。

另:其它各种另 ph值的 0.2m pb(100ml)配方 :

ph 0.2m nah2po4(ml) 0.2m na2hpo4(ml)

5.7 93.5 6.5

5.8 92 8

5.9 90 10

6.0 87.7 12.3

6.1 85 15

6.2 81.5 18.5

6.3 77.5 22.5

6.4 73.5 26.5

6.5 68.5 31.5

6.6 62.5 37.5

6.7 56.5 43.5

6.8 51 49

6.9 45 55

7.0 38 62

7.1 33 67

7.2 28 72

7.3 23 77

7.4 19ml 81ml

7.5 16 84

7.6 13 87

7.7 10.5 90.5

7.8 8.5 91.5

7.9 7 93

8.0 5.3 94.7

0.01m磷酸盐缓冲液(pbs)配制方法

称取8g nacl、0.2g kcl、1.44g na2hpo4和0.24g kh2po4,溶于800ml蒸馏水中,用hcl调节溶液的ph值至7.4,最后加蒸馏水定容至1l即可。在15lbf/in2(1034×105pa)高压下蒸气灭菌(至少20分钟),保存存于室温或4℃冰箱中。

需要注意的是,通常所说的浓度0.01m指的是缓冲溶液中所有的磷酸根浓度,而非na 离子或k 离子的浓度,na 离子和k 离子只是用来调节渗透压的。如果是用于免疫组化的话,则需要在配置的时候分别加入100 u/ml青霉素和链霉素之后再调ph、定容、灭菌消毒。

ph 7.6 7.4 7.2 7.0

h2o 1000 1000 1000 1000

nacl 8.5 8.5 8.5 8.5

na2hpo4 2.2 2.2 2.2 2.2

nah2po4 0.1 0.2 0.3 0.4

根据经验来看,新鲜配置的pbs搅匀后其ph值约在7.2-7.4之间,可是在温度的影响下,尤其在夏天,其电离常数发生了改变,在经过昼夜的时间后,ph值会明显改变(我亲自测过偏酸)。所以做实验的同学可要注意了,ph值可能会影响实验结果,甚至可能导致阴性。所以务必记得这个时候和天气,要加强实验条件控制问题。每次使用前最好用试纸测一下过夜了的pbs,如果发生偏酸或偏碱,注意重新换新液。

pbs缓冲液

称取nacl 8g,kcl 0.2g,na2hpo4?12h2o 3.63g, kh2po4 0.24g,溶于900ml双蒸水中,用盐酸调ph值至7.4,加水定容至1l,常温保存备用。

pbst缓冲液

取300μl tween-20 加入pbs 100ml中,混匀后即刻使用。现用现配。

如果是把所有固体加大十倍,配置为浓缩液,工作时候十倍稀释,那么,在刚配好浓缩液时,ph在6.5左右,明显偏酸。不能用盐酸调。虽然可以用氢氧化钠颗粒调,但是有更方便的方法。

十倍稀释以后,ph自动升高到所需要的值。不需要其它任何处理。这个可以先取少量试一试,配好之后再测一次~

ph8.0的pbs配方详细

1. nacl 137mmol/l,kcl 2.7mmol/l,na2hpo4 4.3mmol/l, kh2po4 1.4mmol/l

2. 向烧杯中加入约800 ml的去离子水,充分搅拌溶解。

3. 滴加浓盐酸将ph值调节至8.0,然后加入去离子水将溶液定容至1 l。

4. 高温高压灭菌后,室温保存。

注意:上述pbs buffer中无二价阳离子,如需要,可在配方中补充1 mm cacl2和0.5 mm mgcl2。

0.05mol/l pbs(磷酸缓冲液phosphate buffer solution,pbs)的配制:

甲液:0.05mol/l na2hpo4溶液 :称取磷酸氢二钠9.465g 7.099g,加蒸 馏水至1000ml ;

乙液:0.05mol/l kh2p04溶液: 称取磷酸二氢钾, 9.07g 6.803g,加蒸馏水至1000m1。

将甲乙液分装在棕色瓶内,于4℃冰箱中保存,用时甲、乙两液各按不同比例混合,即可得所需ph的缓冲液,见下表:

ph 甲液ml 乙液mi

5.29 2.5 97.5

5.59 5.0 95.0

5.91 10.0 90.0

6.24 20.0 80.0

6.47 30.0 70.0

6.64 40.0 60.0

6.81 50.0 50.0

6.98 60.0 40.0

7.17 70.0 30.0

7.38 80.0 20.0

7.73 90.0 10.0

8.04 95.0 5.0

你要配制ph=6.8的pbs,可用甲、乙液各50ml混合即可。

版主111留言:

感谢兄弟的积极参与

2011-11-10 23:37

投票3

收藏7

打赏

引用

分享

举报

111 edited on 2011-11-11 22:05

?一名医务工作者参与美国远程会诊亲身经历

相关阅读
  • pbs缓冲液浓度的含义
  • 磷酸盐缓冲液的配置方法
  • 新车该如何配置
  • 25寸康佳T2576S该机该如何进入总线
  • 鸡粪该怎样处理啊?
  • 机械液压系统泄漏该怎样维护啊?
  • 不同季节该如何配置香水
  • 买组装电脑应该注意些什么啊?
  • 男士的皮肤夏天该如何保养啊?
  • 买索尼dsc-w130的数码相机都有什么
  • 2P应该怎么配置新手设计1台冷冻水
  • 无线电子吊秤打印不出来,该如何解
  • 资产该如何配置 教你买银行理财产
  • 求助变频空调应该怎么加氟
  • 兔颗粒饲料应该怎样配置
  • 大棚辣椒温度应该是多少啊
  • 浅谈PH缓冲液的配置和保存方法
  • 格力这机子热保现在应该往哪修理啊
  • 实验室常用试剂、缓冲液的配置方法
  • 棉花上有很多青虫,应该怎么办啊?
  • 34寸厦华MT3426)这款机子的+B应该
  •  



     
     
         

    收录时间:2016年12月05日 07:28:14 来源:复制网 作者:匿名
    上一篇:取样,加入适量水中,搅拌,取上清液,滴加酚酞,如溶液变红色,  (电脑版  手机版)
     
    创建分享人
    彭元逊
    最新问题
     
    喜欢此文章的还喜欢
  • 【求助】pbs缓冲液应该如何配置
  • 取样,加入适量水中,搅拌,取上
  • sae china j2901-2013 车用尿素
  • 小红和小林坐氢氧化钠溶液与酚酞
  • 已知用10%氢氧化钾溶液56g滴加到
  • 氢氧化钠溶液是什么?
  • [红褐色沉淀]向某盐溶液中加入足
  • 分别向下列化肥中加入氢氧化钠溶
  • 车用尿素溶液产生背景
  • 可兰素车用尿素溶液有毒吗
  • Copyright by www.chinabaike.com;All rights reserved. 联系:QQ:469681782