高效色谱仪的适用性试验

高效色谱仪的适用性试验通常包括理论塔板数、分离度、精密度和对称因子等指标。
一、理论塔板数:
在规定的色谱条件下,注入样品溶液,记录色谱图,量出样品峰的保留时间tr(以分钟或长度计)和半峰宽(W0.5h),按n = 5.54(tr/W0.5h)2计算色谱柱的理论塔板数。若达不到规定的理论塔板数,需更换色谱柱。
二、分离度:
分离度是相邻两组分色谱峰保留值之差与两组分色谱峰底宽平均值的比值。即:
R = 2(tr2-tr1)/(W1+W2)
式中:tr为组分保留时间,W为峰底宽。
无论是定性分析还是定量分析,均要求待测峰与其它峰之间有较好的分离度。
除另有规定外,分离度应大于1.5。
三、精密度:
精密度指使用同一方法、对同一样品进行多次测定所得测定结果的一致程度。通常以相对标准偏差表示。
取各品种项下的对照溶液,连续进样5次,除另有规定外,其峰面积测量值的相对标准偏差应不大于2%。
四、对称因子:
fs = W0.05h/(2A)=(A + B)/(2A)
式中:W0.05h为0.05倍峰高处的峰宽。
A、B分别为0.05倍峰高处的色谱峰前沿和后沿与峰顶点至基线的垂线之间的距离。
1、对称峰:fs = 0.95~1.05
2、前延峰:fs<0.95
3、拖尾峰:fs>1.05
为保证分离效果和测量精度,应检查待测峰的对称因子是否符合各品种项下的规定。
    
来源:http://www.fudizao.com
    

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